Optimización del ensayo de inmunoreactividad por el método de cromatografía de afinidad en capa fina para anticuerpos monoclonales marcados con tecnecio-99m

Abstract

Los anticuerpos monoclonales marcados con Tc-99m, deben de conservar su capacidad de unirse selectivamente a otra molécula. Para ello se empleó el método de cromatografía de afinidad en capa fina (CACF) para determinar el porcentaje de unión especifica o fracción inmunoreactiva, la misma que no dio buenos resultados, por ello se decide optimizar dicha técnica variando los tiempos de fijación del antígeno CEA con la fase estacionaria a 20 segundos y 30 minutos. Los primeros resultados obtenidos, son que el tiempo óptimo de contacto del antígeno con la fase estacionaria para el ensayo de inmunoreactividad por CACF es de 30 minutos, tanto para los controles positivos como para los controles negativos. El porcentaje de unión específica obtenido alcanza valores mayores de 75 % y el porcentaje de unión inespecífica alcanza valores menores de 25 % resultado que nos confirma que el anticuerpo marcado conserva sus propiedades inmunoreactivas.

The labelling monoclonal antibodies with Tc-99m, must conserve their capacity to be united selectively to another molecule. For it use the method of affinity thin layer chromatography (ATLC) to determine the percentage of specific union or immunoreactivity fraction, the same one that did not give good results, for that reason is decided to optimize this technique being varied the times of fixation of antigen CEA with the stationary phase to 20 seconds and 30 minutes. The first obtained results, are that the optimal time of contact of the antigen with the stationary phase for the test of immunoreactivity by ATLC is of 30 minutes, as much for the positive controls as for the negative controls. The percentage of union specifies obtained reaches greater values of 75 % and the percentage of non specific union reaches smaller values of 25 % result that confirms to us that the noticeable antibody conserves its immunoreactivity properties.