Validación de la técnica de PCR para la amplificación de una secuencia de 118pb. del exón 2 perteneciente al gen TLR2 de alpaca (Vicugna pacos)

Abstract

Las enfermedades infecciosas en alpacas, constituyen un serio problema en la pérdida económica del sector alpaquero. Este trabajo tuvo por objetivo validar la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR), para la amplificación de una secuencia de 118 pb del exón 2 del TLR2 utilizando cebadores reportados en ovino. Para este estudio se evaluaron 100 muestras de ADN de alpacas pertenecientes al Fundo Mallkini –Melgar, Puno. Se evaluó la sensibilidad y especificidad de la PCR utilizando diferentes condiciones de PCR y concentraciones de ADN genómico de alpaca (5 ng/µL, 10 ng/µL, 15 ng/µL, 20 ng/µL, 25 ng/µL, 30 ng/µL). La técnica de PCR mostró una elevada sensibilidad y especificidad para la amplificación de un fragmento de 118 pb del exón 2 del TLR 2 y es una alternativa para la amplificación de una región conservada del TLR 2 utilizando cebadores provenientes de ovino.

Infectious diseases in alpacas are a problem because of the economical loss in this important sector of the economy. The aim of the study was to validate the technique of Chain Reaction Polymerase (PCR) to amplify a 118 bp sequence of exon 2 of TLR 2 using primers reported in ovine. One hundred samples of alpaca DNA belonging to the Mallkini breeding center Melgar-Puno were examined. The PCR sensibility and specificity were evaluated using different PCR conditions and genomic alpaca DNA concentrations (5 ng/µL, 10 ng/µL, 15 ng/µL, 20 ng/µL, 25 ng/µL, 30 ng/µL). The PCR technique showed a high sensibility and specificity for the amplification of a 118pb fragment from Exon 2 of TLR 2 and it is an alternative for the amplification of conservated region of TLR2 using ovine primers.